Andrologia, Spermiogramma

Sperm-mucus penetration test (Kremer test)

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Nell’esame del liquido seminale lo sper-mucus penetration test (SMPT)  è di solito il primo e più comunemente test eseguito, dopo lo spermiogramma, nelle consultazioni di infertilità. 

Questo test, che è attualmente il test di riferimento dell’Organizzazione mondiale della sanità (OMS 1999), misura principalmente i parametri di vitalità e motilità degli spermatozoi in condizioni fisiologiche.  Alcuni AA. hanno sostenuto che lo spermiogramma di routine fornisce solo informazioni prognostiche limitate sulla fertilità (Branigan et al ., 1999 ; Tomlinson et al., 1999Guzick et al ., 2001). 

Il test di Kremer colma in parte questa lacuna fornendo una valutazione della funzionalità spermatica nonché misurazioni di concentrazione, motilità e morfologia (ESHRE, 1996Oehninger et al., 2000; Mortimer, 2000). 

Tecnica – Il muco cervicale è raccolto dall’ostio cervicale tramite una cannula sottile (aspiglaire) e posizionato in un capillare millimetrato rettangolare che pesca in una vaschetta in cui è versato il seme dopo liquefazione (vedi figura). Lo strumento è   posto in incubatore a CO2 riscaldato a 37 °C. 

I parametri valutati includono  il grado di penetrazione a distanza, il conteggio degli spermatozoi e la velocità a 10, 20, 30, 40 e 120 minuti. Di questi, il parametro più comunemente usato è il tempo trascorso per coprire la distanza di 30 mm nel capillare. (Ulstein et al., 1972Matthews et al., 1980Alexander, 1981 David et al. 1979;Aitken et al. (1992) e Ivic et al. (2002), 

L’utilità dell’SMPT nella gestione dell’infertilità non è stata finora valutata in modo sufficientemente rigoroso per una serie di ragioni. Ad esempio, molti dei principali progetti di studio volti a misurare l’accuratezza dell’SMPT in passato non hanno facilitato la misurazione della sensibilità, della specificità e dei rapporti di verosimiglianza (LR). In altri, la scelta di un riferimento o di un gold standard non era l’ideale, aveva fattori di confusione o la popolazione studiata era ristretta, coinvolgendo solo donatori di sperma. Di conseguenza, non esistono tassi diagnostici di soglia di gravidanza o di fertilizzazione convalidati per l’analisi del seme normale / anormale. 

Questa revisione sistematica è stata condotta per rispondere alla domanda clinica: la penetrazione degli spermatozoi in vitro nel muco cervicale o nei suoi sostituti è uno strumento diagnostico accurato nella valutazione dello sperma? Vexata questio!

Muco cervicale – Il muco cervicale svolge un ruolo importante nella selezione di spermatozoi mobili e morfologicamente normali per la fecondazione. Ne favorisce la migrazione e induce la reazione acrosomiale. Per questo motivo, l’SMPT ha sempre rappresentato un importante test di funzionalità spermatica in vitro. Tuttavia, il muco cervicale umano (hCM), oltre ad essere difficile da ottenere in grandi quantità, possiede ampie variazioni di viscosità (Karni, 1971.  Organizzazione mondiale della sanità, 1987; Eggert-Kruse et al ., 1989). Di conseguenza, i sostituti del muco cervicale in molte forme sono ora comunemente usati in questi test. Il muco cervicale bovino (bCM) è particolarmente comune perché è più facile da ottenere in grandi quantità, ha proprietà reologiche e biochimiche simili a hCM e può essere immagazzinato nello stadio congelato con solo minime variazioni delle proprietà reologiche (Meyer, 1977Gaddum-Rosse et al ., 1980Lee et al ., 1981).  Molto spesso alla donna  viene preventivamente prescritto un trattamento a base di estrogeni per migliorare la qualità del muco cervicale.

L’acido ialuronico (HA) è stato descritto come un’alternativa adatta. È un muco-polisaccaride con una struttura simile a quella del muco cervicale (Bothner e Wik, 1987) e una viscosità vicina all’hCM (Karni 1971Ishijima et al ., 1986). 

Più recentemente, la metilcellulosa (MC) è stata valutata come mezzo efficace per degli spermatozoi, paragonabile all’efficacia dell’HA (Ivic et al ., 2002). 

Capillari – i primi problemi insorsero utilizzando tubi capillari e micropipette con sezioni circolari (Kremer, 1965 ; Ulstein, 1973 ; Kerin et al ., 1976 ). Questo problema, ben descritto da Kremer e Kroeks (1975 ), è dovuto alla distorsione ottica dovuta alla curvatura delle pareti circolari. Il problema è stato parzialmente risolto con la successiva introduzione di tubi capillari piatti. 

Gli spermatozoi  si muovono ad una velocità media di circa 2 millimetri al minuto. La distanza che devono coprire, dalla cervice uterine al terzo distale tubarico,  è di circa 16-20 cm (l’utero è lungo circa 6-9 cm e le tube uterine circa 10 cm), e richiede circa 90-120 minuti.

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